早期白癜风多久能治好 http://m.39.net/pf/a_4662958.html

摘要：FDA复杂仿制药的研究思路有可能为中药质量相似性/一致性评价提供参考。通过FDA首个口服植物药crofelemer的说明书了解其研究基础，结合crofelemer的等效性评价具体产品指南对中药质量一致性评价情况进行分析，跟进当前中药质量一致性评价的技术进展，旨在为中药质量相似性/一致性评价提供研究思路。提高中药质量批间一致性，应加强中药的基础研究，探索具有可行性的中药质量相似性/一致性技术评价方法，建议评价理化性质的相似性/一致性，评价生物活性（毒性）测定的相似性/一致性，并视情况对具有临床终点的生物等效性进行评价。

美国食品药品监督管理局（FoodandDrugAdministration，FDA）复杂仿制药的研究思路有可能为中药质量相似性/一致性评价提供参考。FDA定义的复杂仿制药包含天然来源的复杂活性成分，如来源于猪肠的依诺肝素钠注射液，或口服植物药crofelemer等[1]。从FDA复杂仿制药的研究现状来看，中药质量相似性/一致性评价所涉及的药物等效性及生物等效性评价目前尚存在一定难度[2-4]。本文通过FDA首个口服植物药crofelemer的说明书了解其研究基础，结合crofelemer的等效性评价具体产品指南对中药质量一致性评价情况进行分析，跟进当前中药质量一致性评价的技术进展，旨在为中药质量相似性/一致性评价提供研究思路。

1crofelemer说明书相关内容

FDA首个口服植物药crofelemer（商品名Mytesi）于年获批[5]。crofelemer缓释片是一种抗腹泻药，适用于接受抗逆转录病毒疗法的人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征（humanimmunodeficiencyvirus/acquiredimmunodeficiencysyndrome，HIV/AIDS）成年患者的非感染性腹泻症状缓解，药品规格为mg/片，给药剂量为1片/次，2次/d。其剂型为延迟释放片剂，为肠溶药物。根据年11月最新修订的crofelemer说明书对其化学成分表征、临床药理学、临床研究进行介绍[6]。

1.1化学成分表征

crofelemer是从CrotonlechleriMüll.Arg.的红色乳胶中提取的一种植物药。crofelemer是一种低聚原花青素混合物，主要由(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素、(+)-没食子酰儿茶素和(-)-表没食子儿茶素的单体单元组成，以随机顺序连接。通过间苯三酚的降解测定，低聚物的平均聚合度为5～7.5。辅料（不含包衣辅料）为胶体二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁和微晶纤维素。

1.2临床药理学

1.2.1作用机制crofelemer既是环状单磷酸腺苷刺激的囊性纤维化跨膜电导调节剂（cysticfibrosistransmembraneconductanceregulator，CFTR）氯离子（Cl?）通道的抑制剂，也是肠上皮细胞腔膜上钙激活的Cl?通道（calcium-activatedCl?channel，CaCC）的抑制剂。CFTRCl?通道和CaCC调节肠上皮细胞的Cl?和液体分泌。crofelemer的作用是阻断腹泻中Cl?的分泌并伴随大量水分流失，使Cl?和水在胃肠道中的流动正常化。

1.2.2药效学与crofelemer的作用机制（即抑制胃肠腔中的CFTR和CaCC）一致，数据表明，与安慰剂（n＝24）相比，连续4d每日4次服用mgcrofelemer（每日推荐剂量的8倍）的患者（n＝25），粪便中的氯化物浓度下降；接受crofelemer治疗的非裔美国患者（n＝3）相对于安慰剂（n＝5），和接受crofelemer治疗的不是非裔的美国患者（n＝22）相对于安慰剂（n＝19），粪便氯浓度均有所下降。

心脏电生理学：在最大推荐剂量的10倍剂量下，crofelemer不会将校正后的QT间隔（correctedQTinterval，QTc）延长至任何临床相关程度。其中QT间隔指心电图中q波到t波之间的时间。

1.2.3药动学

（1）吸收：健康成人和HIV阳性患者口服给药后crofelemer的吸收极低，血浆中crofelemer的浓度低于定量水平（50ng/mL）。因此，无法估计曲线下面积（areaundercurve，AUC）、峰浓度（peakconcentration，Cmax）和半衰期等标准药动学参数。

食物的作用：在健康受试者中，高脂膳食中服用crofelemer与crofelemer全身暴露量的增加无关。在临床试验中，在早、晚饭前0.5h服用单剂量mg的crofelemer（推荐剂量的4倍）。

（2）药物相互作用研究：体外研究表明，crofelemer具有抑制多药耐药相关蛋白2（multidrugresistance-associatedprotein2，MRP2）和有机阴离子转运多肽1A2（organicanion-transportingpolypeptide1A2，OATP1A2），但对肠道中预期浓度的P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）和乳腺癌耐药蛋白（breastcancerresistanceprotein，BCRP）没有抑制作用。由于对crofelemer的吸收极小，所以crofelemer不太可能对细胞色素P同工酶1A2、2A6、2B6、2C9、2C19、2D6和2E1有系统抑制作用。

奈非那韦、齐多夫定、拉米夫定：一项在健康受试者中进行的交叉研究结果显示，5d每日4次服用mgcrofelemer（每日推荐剂量的8倍）对单剂量给药时齐多夫定和奈非那韦的暴露没有影响。在同一项研究中，拉米夫定的暴露量也降低了20%，但不被认为具有显著的临床意义。

咪达唑仑：体外研究表明，crofelemer具有在肠道预期浓度中抑制细胞色素P3A4（cytochromeP3A4，CYP3A4）酶的潜能。在健康受试者中，连续6d每日口服2次mgcrofelemer（推荐剂量的4倍）后，评估了crofelemer对单次口服2mg咪达唑仑（一种敏感的CYP3A4底物）药动学的影响。与单独服用咪达唑仑相比，咪达唑仑及其活性代谢物羟基咪达唑仑在与crofelemer并用后未见平均Cmax和AUC的显著变化。

1.3临床研究

在一项随机、双盲、安慰剂对照（1个月）和无安慰剂（5个月）的多中心研究中评估了crofelemer的疗效。该研究招募了名HIV阳性患者，接受稳定的抗逆转录病毒治疗，腹泻病史为1个月或更长时间。该研究具有2个阶段的自适应设计。在这2个阶段中，患者均接受安慰剂治疗10d（筛查期），然后随机分配至头孢洛美或安慰剂治疗31d（双盲期）。在筛选期间的最后7d中，至少有5d每天出现1次或更多水样排便的患者被随机分配到双盲期。每个阶段分别招募患者；根据对第1阶段数据的中期分析，选择第2阶段的剂量。在第1阶段，将患者按1∶1∶1∶1的比例随机分配到3种crofelemer剂量方案（mg，2次/d，或2种较高剂量方案之一）或安慰剂中。在第2阶段，患者按1∶1的比例随机分配到crofelemermg，2次/d或安慰剂。每个研究阶段还有1个为期5个月的无安慰剂时期，随后是双盲时期。用crofelemer治疗的患者在无安慰剂期间继续服用相同剂量的药物。在第1阶段，接受安慰剂的患者在无安慰剂时期被重新随机分配为3种crofelemer剂量方案之一（mg，2次/d，或2种较高剂量方案之一）中的1种。在第2阶段，接受安慰剂的患者在无安慰剂期间接受crofelemermg，2次/d的治疗。主要疗效终点是有临床反应的患者比例，即在安慰剂对照阶段的4周中至少有2周，每周少于或等于2次水样肠蠕动。那些同时服用抗腹泻药或阿片类药物的患者被视为临床无反应者。与安慰剂组相比，crofelemermg，2次/d组患者出现临床反应的比例明显更高（18%vs8%，单侧P＜0.01）。在随机临床研究中，对腹泻持续时间、每日水样排便基线次数、蛋白酶抑制剂的使用、CD4细胞计数和年龄亚组的检查没有发现这些亚组间crofelemer治疗效果的一致性方面存在差异。

2crofelemer的具体产品指南[7]

FDA的具体产品指南一般是指仿制药的生物等效性指南，crofelemer被认为是复杂仿制药。指南包括3部分内容：关于植物原料的鉴别和质量评估建议；证明植物原料相同性的建议；证明生物等效性的建议（研究类型为临床终点生物等效性研究）。详细介绍这3方面的内容，并结合crofelemer说明书中所体现的研究基础进行分析。

2.1植物原料的鉴别和质量评估建议

crofelemer的植物原料应从C.lechleri的红色乳胶中采集。应基于宏观/微观和/或遗传物质分析等技术正确识别和鉴定植物物种。应从具有确定生态地理区域的成熟树中收集作为植物原料的粗乳胶。实施和执行已建立的良好农业和采集规范程序将最大程度地减少植物原料的差异，并确保crofelemer的批间一致性。应检测植物原料的crofelemer含量、总酚类和塔斯品碱含量，并检测重金属和农药残留。

2.2证明原料药相同性的建议

通过体现试验原料药和参比制剂原料药之间的等效性，可以建立原料药的相同性。建议至少应对3批样品和参比制剂进行特性分析，以评估制备过程中原料药的相同性和耐用性。以下3个标准可用于证明原料药的相同性。

2.2.1crofelemer理化性质的等效性应进行以下理化表征以证明原料药的相同性：相对分子质量分布；crofelemer的总体结构特性，包括但不限于圆二色谱、元素分析、傅里叶变换红外光谱、紫外光谱、超高效液相色谱、核磁共振波谱、X射线衍射、液相色谱-质谱法。

寡聚物中单体结构单元的组成、儿茶素/表儿茶素与没食子儿茶素/表没食子儿茶素的平均单体比、平均聚合度，以及低聚物在消化（解聚）后的转化率（对于一般的头孢乐美素）应相当于参比制剂中的原料药。考虑到crofelemer的复杂性，应对上述每种分析方法进行正交分析，以全面表征和证明crofelemer仿制药与参比制剂之间的相同性。根据crofelemer说明书信息可知，本品的化学成分表征较为全面，明确了低聚原花青素的4个单体单元，并测定出了低聚物的平均聚合度。本品化学成分方面的研究基础可以支持运用各种分析手段，证明crofelemer仿制药与参比制剂之间的相同性。这部分研究对仪器的要求，以及数据分析能力的要求较高。

2.2.2crofelemer成分和其他伴随成分的化学指纹图谱的等效性具有不同分离/检测原理的单一或多种分析方法可用于生成crofelemer及其伴随成分的完整化学指纹图谱。对于完整的化学指纹图谱中显示的所有化学成分，crofelemer仿制药与参比制剂之间应在质量和数量上可比。

化学指纹图谱的等效性也是基于crofelemer化学成分表征较为全面的前提下进行的研究。我国学界在中药的指纹图谱方面具有一定的研究基础，主要研究热点为指纹-功效关系研究。

2.2.3生物测定结果的等效性生物测定可以用作等效性的确认检测，并可以提供crofelemer相同性的补充确认。FDA建议申请人开发并验证一种基于细胞的测定法，该测定法可反映出crofelemer的作用机制，以证明其具有同等的生物活性。

根据crofelemer说明书信息可知，本品对临床药理学方面进行了较为全面的研究，如阐明了本品的作用机制（即抑制胃肠腔中的CFTR和CaCC），并对药效学、药动学进行了研究。在此研究基础上，具备开发基于细胞的生物测定方法的可能性，以证明生物等效性。我国学界对中药的生物活性（毒性）测定具有一定的研究基础。

2.3证明临床终点生物等效性的建议

研究类型：具有临床终点的生物等效性研究；试验设计：随机、双盲、平行、对照；药物剂量为mg；受试对象：接受抗逆转录病毒治疗并伴有分泌性腹泻的HIV阳性男性和女性，年龄18～60岁。

生物等效性基于（95%置信区间，95%confidenceinterval，95%CI）：临床终点。

溶出度测试方法和采样时间[8]：美国药典仪器II（Paddle），体积流量为75r/min，酸阶段：0.1mol/LHCl（mL），2h；缓冲液阶段：pH6.8的磷酸钠缓冲液（mL），5、10、20、30、45min。受试者随机口服试验样品crofelemermg缓释片、参比制剂crofelemermg缓释片或安慰剂，2次/d，持续4周。主要终点是有临床反应的受试者比例，临床反应定义为在研究的4周中至少有2周每周有≤2次水样排便。在收集主要终点数据的4周之前，该研究应包括3d的磨合期。另外，具有临床终点的生物等效性研究建议中，包括纳入和排除标准；受试者水平分析数据集，每个受试者1个记录（如适用）；基本数据结构数据集，记录每个受试者、每个分析时间点（如适用）等。其中，受试者水平分析数据集记录的与临床疗效相关的信息包括腹泻持续时间、每日水样排便基线次数、抗逆转录病毒治疗方案、每周水样排便次数、4周中至少有2周每周水样排便次数≤2次（是/否）、依从率（%）、受试者连续超过预定天数未达到预定剂量（是/否）、不良事件报告（是/否）、伴随用药（是/否）。根据crofelemer说明书信息可知，本品的临床研究中，主要疗效终点与具有临床终点的生物等效性研究中的主要终点一致。具有临床终点的生物等效性研究中的受试者水平分析数据集所记录的临床疗效相关信息，与临床研究中的信息有相同之处。

3中药质量相似性/一致性评价的思考

上述以crofelemer的理化性质等效性、生物测定结果等效性，以及具有临床终点的生物等效性评价为例，体现了目前植物药质量一致性的技术评价水平。以下对中药的质量一致性评价研究进展进行梳理。

3.1中药质量一致性评价的方法

文献综述了基于化学指纹结合化学计量学方法的中药质量评估，分析方法包括色谱法、振动光谱法、核磁共振光谱法和质谱[9]。具体分析方法：（1）化学指纹技术，包括色谱、光谱技术（振动光谱法、原子光谱、核磁共振波谱）、质谱联用技术；（2）化学计量学方法，包括数据预处理、数据展开和多路分解、数据融合策略、异常样本检测、无监督探索性学习、监督学习（分类分析、回归分析）。另有文献提出了中药化学评价的基本原理、技术特点和应用实例，以及将生物学评价方法与化学评价结合用于中药质量一致性评价[10]。具体评价方法：（1）化学一致性评价方法，包括色谱评价技术（单组分含量测定、多种成分含量测定、化学指纹图谱、单个标记物对多种成分进行定量分析）、光谱评价技术（近红外光谱、拉曼光谱、激光诱导击穿光谱、同步辐射X射线计算机断层扫描）；（2）生物一致性评价方法，包括生物测定、生物反应谱、生物基因表达谱等；（3）化学-生物整体评价，包括化学指纹图谱-生物效应图、有效等效、代谢组学。

3.2中药质量一致性评价的应用实例

近年，关于中药质量的一致性评价相关研究主要集中在一方面用定量指纹图谱较全面和准确地对化学成分进行表征；另一方面结合生物活性检测分析指纹-功效关系，评估化学特征成分与生物活性之间的关系。综合运用以上分析方法，从化学一致性和生物一致性2个方面，有可能从整体上对中药质量的一致性进行评价。中药质量一致性评价的应用实例见表1。

3.3中药质量相似性/一致性评价的可能适用情形

中药质量相似性/一致性评价的可能适用情形包括（不限于）：（1）中药同名同方药的技术评价；（2）中药改良型新药的技术评价（如适用）；（3）古代经典名方中药复方制剂研究过程中，评价古代制备方法与现代大生产工艺所得样品的相似性/一致性[18]；（4）生产过程中，通过对中药制剂或中间体进行质量相似性/一致性评价，识别可能影响中药质量的关键生产环节[19]；（5）其他有可能需进行质量相似性/一致性评价的情形，如工艺变更、生产场地变更、技术转让等。中药质量相似性/一致性评价对于中药制剂（特别是中药复方制剂）而言有一定难度，可优先考虑应用于技术可及且需重点