肠易激综合征发病机制之一
年10月23-27日，第18届欧洲消化疾病周（UEGW）在西班牙巴塞罗那举行。在本届年会上，关于肠易激综合征（IBS）的最新研究主要涉及其发病机制方面的基础研究及临床治疗方面的新进展。本期D2~D3版将其中关于IBS发病机制方面的研究主要内容介绍如下。
图IBS发病的相关机制示意图神经肽S受体1（NPSR1）使肠屏障透过率增加，使肠上皮内分泌细胞释放的5-羟色胺（5-HT）的再吸收受到影响；肠上皮通透性增加，导致肠腔内细菌等可以大量通过肠黏膜。
1.细菌过度生长
在IBS患者中，小肠细菌过度生长的发生率为45.5%，而在非IBS患者中，该发生率仅为12.5%。目前，小肠细菌过度生长仍是IBS发病机制中的一个存在争议的问题。在本届年会上，希腊学者报告了1项关于小肠细菌过度生长与IBS发病关系的队列研究结果。
该研究自年起连续纳入例接受上消化道内镜检查的患者，其中IBS患者55例（符合罗马诊断标准）和非IBS患者95例。所有患者均无艾滋病病毒、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒感染，也无肝硬化及胃肠道出血。经内镜采集所有患者十二指肠第二部的肠液，并在体外需氧环境下进行细菌定量培养。采用API20E系统鉴定革兰阴性菌。小肠细菌过度生长的定义为肠源性细菌量达到个菌落/毫升。
结果显示，在纳入的例患者中，有37例（24.7%）患者存在小肠细菌过度生长。在55例IBS患者中，有25例（45.5%）存在小肠细菌过度生长，而在95例非IBS患者中，仅12例（12.5%）存在小肠细菌过度生长（P0.）。IBS患者发生小肠细菌过度生长的比值比（OR）为5.76（P0.）。
对十二指肠液进行细菌培养及菌种鉴定的结果显示，在IBS患者中，大肠杆菌感染有7例（12.7%），肠球菌属6例（10.9%），其他肠杆菌科10例（18.2%）。在非IBS患者中，大肠杆菌感染3例（3.1%），肠球菌属6例（6.1%），其他肠杆菌科6例（6.1%）。IBS患者与非IBS患者间存在显著差异（P0.）。多元回归分析显示，IBS与小肠细菌过度生长间存在较强的相关性（OR=6.09，Plt;0.）。研究者认为，IBS患者具有较高的小肠细菌过度生长发生率，IBS与小肠细菌过度生长之间可能存在紧密联系。
2.肠道屏障功能改变
IBS患者肠上皮细胞紧密连接蛋白表达明显降低；肥大细胞类胰蛋白酶介导了肠上皮通透性的增加。最近，越来越多证据表明肠道通透性的改变和肠屏障功能的缺陷在IBS发病中起一定作用，但具体机制还不是很明确。
IBS患者紧密连接蛋白表达显著降低
在正常情况下，肠上皮细胞间的间隙是由连接复合物封闭，其中最重要的是紧密连接。紧密连接由多种紧密连接蛋白分子组成，包括跨膜蛋白occludin、claudin、连接黏附分子（JAM）和胞质带状闭合蛋白ZO等（见图）。
肠道通透性增加是IBS重要的病理生理机制，而肠道通透性增加可能与肠道上皮细胞间紧密连接蛋白的改变密切相关。在本届UEGW上，法国学者交流了1项比较IBS患者和健康对照组结肠黏膜紧密连接蛋白表达差异的前瞻性研究。
该研究共纳入23例IBS患者（女性20例，平均46.22岁，均符合罗马诊断标准）和20名对照（女性12名，平均为59.65岁）。在23例IBS患者中，9例为腹泻型（IBS-D），6例为便秘型（IBS-C），8例为腹泻便秘交替型（IBS-A）。在23例IBS患者中，3例（13%）是感染后IBS（PI-IBS）。对照组均接受肠镜筛查。采用视觉模拟量表（VAS）量化IBS症状的严重程度。抽提结肠活检组织蛋白，并通过蛋白质印迹分析检测紧密连接蛋白（claudin1、ZO-1和occludin）的表达。
结果显示，与对照组相比，IBS患者的3种紧密连接蛋白的表达水平明显降低，其中腹痛VAS评分高于6分的IBS患者紧密连接蛋白claudin1和occludin的表达水平最低（P0.05）。同时，与病程1年以上的IBS患者相比，最近诊断IBS患者的claudin1和occludin的表达水平更低（P0.05）。该研究提示，IBS患者结肠组织紧密连接蛋白（claudin1、ZO-1和occludin）表达明显下降，这可能是导致IBS患者肠上皮通透性改变的主要因素。
肠上皮通透性增加肥大细胞类胰蛋白酶作用大
IBS患者肠道肥大细胞明显增多，这些肥大细胞是否介导了IBS患者肠屏障受损？爱尔兰学者报告，肥大细胞和类胰蛋白酶在IBS患者肠道上皮完整性的受损中起关键作用。
紧密连接对维持上皮细胞屏障功能发挥重要作用，其紧密程度则可由跨上皮电阻来反映。人结肠癌细胞系Caco-2是分化较完全的、具有刷状缘和功能性紧密连接的极性单层细胞系，Caco-2细胞系通常被用来作为体外肠道分泌和屏障功能的一种研究模型。
爱尔兰学者采用人结肠癌上皮细胞系Caco-2与人肥大细胞共培养体系,探讨肥大细胞的蛋白酶和类胰蛋白酶对Caco-2细胞间通透性和紧密连接的影响。研究者采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记-葡聚糖通量和跨上皮电阻变化来评估上皮完整性，采用免疫印迹及共聚焦显微镜检测Caco-2单层细胞间的紧密连接蛋白（Claudin1-3、JAM-A、occludin及E-钙黏素）的表达情况。结果显示，类胰蛋白酶（0.U）作用4小时后，单层细胞通透性增加，跨上皮电阻较对照组降低45%（P0.05），荧光素标记葡聚糖通透性也明显增加（P0.05）。JAM-A和E-钙黏素表达分别下降40%和30%，相反，occludin、claudin3和claudin1的表达则分别增加5倍、2.5倍和1.3倍。
在Caco-2与肥大细胞共培养体系中，肥大细胞脱颗粒处理6小时即可导致跨上皮电阻下降约30%（P0.05），与类胰蛋白酶作用结果一致。同时，JAM-A表达水平下降30%，而occludin、claudin2表达分别增加了20%和25%。该研究显示，类胰蛋白酶参与了胃肠道上皮屏障功能的受损，伴有紧密连接蛋白表达的改变。肥大细胞和类胰蛋白酶在IBS患者肠道上皮屏障损害方面发挥十分关键的作用。
北美医学教育基金会（北京爱博思医疗）
项目负责人：赵经理
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